實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>本實(shí)驗(yàn)旨在利用凈信全自動(dòng)組織研磨儀對骨骼和動(dòng)物組織(脾組織和肌肉組織)進(jìn)行高效、均勻的研磨,以提取高質(zhì)量的DNA、RNA或蛋白,為后續(xù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)的樣本。
實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備:
骨骼:準(zhǔn)備新鮮的動(dòng)物骨骼若干,確保無雜質(zhì)和多余肌肉附著。
脾組織和肌肉組織:準(zhǔn)備新鮮的脾組織和肌肉組織若干,去除脂肪和結(jié)締組織。
研磨儀:凈信全自動(dòng)組織研磨儀(型號(hào):JXFSTPRP-24L)一臺(tái),確保設(shè)備狀態(tài)良好,無故障。
耗材:2ml離心管、2mm氧化鋯珠子、50ml不銹鋼研磨罐、液氮等。
全自動(dòng)組織研磨儀實(shí)拍
實(shí)驗(yàn)步驟:
一、脾和肌肉組織的研磨:
組織處理:將脾組織和肌肉組織分別切成小塊,放入2ml離心管中。確保組織塊大小適中,以便于研磨。
添加珠子:向每個(gè)離心管中加入適量的2mm氧化鋯珠子。珠子數(shù)量根據(jù)組織量而定,一般需覆蓋組織表面。
研磨操作:將裝有組織和珠子的離心管放入凈信全自動(dòng)組織研磨儀中,按照以下參數(shù)設(shè)置進(jìn)行研磨:30s重復(fù)幾次(具體次數(shù)根據(jù)組織硬度而定),間隔10s,頻率65HZ。
檢查研磨效果:研磨完成后,取出離心管,觀察組織是否研磨均勻。如有需要,可再次進(jìn)行研磨。
實(shí)驗(yàn)效果:
脾和肌肉組織樣品研磨前后效果圖
二、骨骼的研磨:
骨骼處理:將一整根的骨頭用鉗子處理成小塊,確保每塊骨頭大小適中,便于研磨。
干燥處理:使用紙巾或吸水紙將骨骼表面的水分吸干,確保研磨過程中無水分干擾。
液氮浸泡:將裝有骨骼的不銹鋼研磨罐旋上蓋子,放入液氮中浸泡幾分鐘,直至研磨罐內(nèi)不再冒泡。此步驟有助于降低骨骼硬度,提高研磨效率。
研磨操作:取出研磨罐,立即放入凈信全自動(dòng)組織研磨儀中,按照以下參數(shù)設(shè)置進(jìn)行研磨:30s,間隔10s,頻率50HZ。注意,由于骨骼硬度較高,研磨過程中可能會(huì)產(chǎn)生較大噪音,需做好防護(hù)措施。
檢查研磨效果:研磨完成后,取出研磨罐,觀察骨骼是否研磨均勻。如有需要,可再次進(jìn)行研磨。
實(shí)驗(yàn)效果:
骨骼樣品研磨前后效果圖
總結(jié):
本次實(shí)驗(yàn)利用凈信全自動(dòng)組織研磨儀對骨骼和動(dòng)物組織進(jìn)行了高效、均勻的研磨,成功提取了高質(zhì)量的DNA、RNA或蛋白。實(shí)驗(yàn)過程中,我們注意到以下幾點(diǎn):
對于脾和肌肉組織,通過添加適量的氧化鋯珠子可以提高研磨效果。珠子數(shù)量和組織量需匹配,以確保研磨均勻。
對于骨骼的研磨,液氮的浸泡是關(guān)鍵步驟。通過降低骨骼硬度,可以提高研磨效率并減少噪音。
在處理組織量特別少的情況下,使用小珠子進(jìn)行研磨可以獲得更細(xì)的研磨效果。
在進(jìn)行骨骼研磨前,一定要將骨骼表面的水分吸干,以避免研磨過程中產(chǎn)生冰晶干擾研磨效果。
通過本次實(shí)驗(yàn),我們再次掌握了凈信全自動(dòng)組織研磨儀的使用方法,并成功應(yīng)用于骨骼和動(dòng)物組織的研磨。這為后續(xù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了可靠的樣本,也為公司藥物研發(fā)工作提供了有力支持。